Reaktiotilavuus yhteensä
528 µL
Tarkastele tätä tulosta yhdessä muiden tulosten kanssa ennen päätöksentekoa.
Suunnittele PCR-mastermixin tilavuudet ylimäärä huomioiden templaatille, alukkeille, vedelle ja reaktion kokonaistilavuudelle.
Aloita tärkeimmistä oletuksista: Reaktiot, Reaktiotilavuus, Templaatin tilavuus. Sen jälkeen säädä yhtä arvoa kerrallaan, jotta näet muutoksen vaikutuksen selvästi.
Reaktiotilavuus yhteensä
528 µL
Tarkastele tätä tulosta yhdessä muiden tulosten kanssa ennen päätöksentekoa.
Master mix -tilavuus
264 µL
Tarkastele tätä tulosta yhdessä muiden tulosten kanssa ennen päätöksentekoa.
Veden tilavuus
179,52 µL
Tarkastele tätä tulosta yhdessä muiden tulosten kanssa ennen päätöksentekoa.
Pääkorteissa korostuvat Reaktiotilavuus yhteensä, Master mix -tilavuus, Veden tilavuus. Alemmat mittarit näyttävät, mistä tulos muodostuu ja mitkä oletukset vaikuttavat siihen eniten.
Templaatti-DNA yhteensä
52,8 µL
Alukkeet yhteensä
31,68 µL
Ylijäämäreaktiot
2,4
Suunnittele PCR master mix -tilavuudet ylijäämällä, templaatilla, alukkeilla, vedellä ja reaktiotilavuudella. Laskuri on tehty vaihtoehtojen vertailuun, ei vain yksittäisen luvun pyörittelyyn. Se kokoaa muuttujat, jotka muuten päätyisivät usein taulukkolaskentaan, päivittää tulokset selaimessa heti ja pitää olennaisimmat luvut näkyvissä, kun muutat oletuksia. Näin voit rakentaa perusvaihtoehdon, varovaisen vaihtoehdon ja kunnianhimoisemman version ilman, että laskennan logiikka katoaa näkyvistä. Tarkoitus ei ole korvata tapauskohtaista asiantuntija-arviota tai alkuperäisiä lähteitä. Tarkoitus on antaa selkeä laskentamalli, jota on helppo tarkistaa ja käyttää vertailun pohjana.
Syötä ensin tilanteeseesi sopivat lähtötiedot: Reaktiot, Reaktiotilavuus, Templaatin tilavuus, Alukkeiden tilavuus, Master mix -osuus, Ylijäämä. Käytä mitattuja arvoja silloin, kun ne ovat saatavilla, ja merkitse epävarmat luvut mieluummin varovaisesti kuin liian optimistisesti. Hyvä työskentelytapa on muuttaa vain yhtä kenttää kerrallaan. Silloin näet, mikä oletus todella liikuttaa tulosta. Jos pieni muutos muuttaa johtopäätöstä selvästi, kyseinen lähtötieto kannattaa tarkistaa paremmin. Laskenta tehdään selaimessa, joten voit kokeilla useita vaihtoehtoja ilman, että tietoja lähetetään palvelimelle.
Reaktiomäärä skaalataan ylijäämällä; jokainen reaktiokohtainen komponentti kerrotaan skaalatulla määrällä ja vesi täyttää jäljelle jäävän tilavuuden. Laskenta antaa samoilla lähtötiedoilla aina saman tuloksen. Välitulokset pidetään numeerisina siihen asti, kunnes ne muotoillaan käyttäjälle. Päätulokset ovat Reaktiotilavuus yhteensä, Master mix -tilavuus, Veden tilavuus. Tukiluvut, kuten Templaatti yhteensä, Alukkeet yhteensä, Ylijäämäreaktiot, auttavat näkemään, mistä kokonaisuus muodostuu.
Älä katso vain ensimmäistä lukua. Ympärillä olevat mittarit kertovat usein, onko tulos vahva, herkkä, kallis, tehokas vai lähinnä suuntaa antava. Suunnittelussa kolmen vaihtoehdon vertailu on yleensä hyödyllisempää kuin yhden tarkalta näyttävän arvion käyttäminen. Tee ensin realistinen perusversio, sitten varovainen versio heikommilla oletuksilla ja lopuksi parempi vaihtoehto. Näiden välinen ero kertoo, kuinka paljon liikkumavaraa suunnitelmassa on ennen kuin se ei enää näytä järkevältä.
Jos oletusarvot ovat lähellä omaa tilannettasi, kirjaa ensin päätulos muistiin. Pienennä sen jälkeen optimistisinta oletusta 10–20 prosenttia ja katso, pysyykö johtopäätös samana. Muuta seuraavaksi keskeistä epävarmaa arvoa ja seuraa, mikä tulos muuttuu ensimmäisenä. Interaktiivisen laskurin etu on, että näet oletusten vaikutuksen heti. Tulosten nimiä voi käyttää myös tarkistuslistana, kun käyt mallia läpi toisen henkilön kanssa.
Laskuri yksinkertaistaa todellisuutta. Se ei huomioi kaikkia tapauskohtaisia rajoitteita tai lähtötietojen epävarmuuksia. Käytä tuloksia suunnittelun ja vertailun apuna ja tarkista kriittiset lähtöarvot alkuperäisistä lähteistä.